Tripeptidul reactiv Limulus este o substanță tripeptidică cu o secvență specifică extrasă din lizat de celule sanguine de crab potcoavă sau sintetizată artificial. Tripeptidul reactiv Limulus este un substrat cromogen utilizat pentru analize cantitative (cum ar fi testul de endotoxină bacteriană) pentru a detecta și măsura componentele bacteriilor Gram-negative.—endotoxine. Atunci când acţionează asupra enzimelor activate de endotoxine, un compus colorat (cum ar fi p-nitroanilina) este eliberat, permiţând măsurarea intensităţii culorii şi corelarea cu conţinutul de endotoxină.
Principiul de lucru
Activarea endotoxinelor: În prezența endotoxinelor, amebocitele din sângele crabului potcoavă eliberează enzime, declanșând astfel cascada de coagulare.
Acțiunea enzimei: enzima activată (de obicei enzima de coagulare) acționează apoi asupra unui substrat cromogen.
Reacție cromogenă: enzima scindează substratul, eliberând un compus galben numit p-nitroanilină (pNA).
Analiza cantitativă: Intensitatea culorii galbene este proporțională cu conținutul de endotoxină din probă și este de obicei măsurată folosind un spectrofotometru la o absorbanță de 405 nm.
Metode de preparare
Tripeptidul reactiv Limulus poate fi obținut prin două abordări în ceea ce privește prepararea.
1. Extragerea componentelor naturale din celulele sanguine Limulus și obținerea tripeptidei active prin separare și purificare.
2. Folosirea tehnologiei de sinteză în fază solidă pentru a conecta secvențial anumite secvențe de aminoacizi, controlând precis structura tripeptidei.
Datorită politicilor de conservare pentru Limulus (cu provincii precum Zhejiang, Fujian, Guangdong și Guangxi care îl înregistrează drept „faună acvatică protejată cheie provincială” / Hong Kong a emis reglementări la sfârșitul anului 2012 care interziceau traulul de fund) și deoarece procesul de extracție este complex și provocator, costul primei metode este relativ mare. Prin urmare, sinteza în fază solidă este acum utilizată în mod obișnuit. Prin conectarea secvenţială secvenţe specifice de aminoacizi, structura tripeptidei poate fi controlată cu precizie. Această metodă nu numai că asigură stabilitatea și consistența produsului, dar permite și producția pe scară largă, satisfacând nevoile industriei farmaceutice pentru testarea reactivilor.
Ora postării: 2025-11-04